免疫球蛋白A/M/D/G/EELISA試劑盒高靈敏度的檢測
免疫球蛋白A/M/D/G/EELISA試劑盒(多種種屬)實驗科研認可品牌
免疫球蛋白A/M/D/G/EELISA試劑盒試劑盒(多種屬)行業(yè)操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl?!?
(5)酶標板置37℃箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)?!?
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔工作液 100μl?!?
(8)酶標板置37℃箱的濕盒內,孵育60min?!?
(9)洗板,同(4)?!?
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min?!?
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應?!?
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以由容器上的劃痕或指印等造成的光。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定。
sCD14ELISA試劑盒(多種種屬)實驗科研認可品牌
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編輯:小檀20180917