143B TK-細胞復蘇及培養(yǎng)細胞
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143B TK-細胞,細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于一196~C液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。復蘇細胞時則直接將裝有細胞的凍存管投入40℃熱水中迅速解凍。NIH-3T3細胞[http://www***********.com/xibaopeiyang/goodsid/fenleisan/3505070/1.html]
143B TK-細胞,細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術,要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和無煙塵.細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側,常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室.
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143B TK-細胞,細胞培養(yǎng)技術與其他一般實驗室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。一般標準的細胞培養(yǎng)室應包括配液室、準備室和培養(yǎng)室。三室既相互連接又相對獨立，各自完成培養(yǎng)過程中的不同操作。t-x<
細胞培養(yǎng)室，*好選擇獨立房間，超凈臺應放置在比較潔凈的房間，如果條件允許，*好按潔凈廠房要求設計細胞培養(yǎng)室，即使房間做不到空氣過濾，也至少應是專用的，進出時要更換工作衣。
培養(yǎng)一個新的143B TK-細胞時要特別注意培養(yǎng)基一致性的問題。因為來自于不同廠家的培養(yǎng)基，即使名字相同或類似，配方也略有差異。仔細閱讀說明書，配方，標簽，確保使用正確的培養(yǎng)基，細胞能適應新的培養(yǎng)基。所有ATCC細胞系，在細胞信息中都注明了培養(yǎng)基。大多數(shù)情況下，推薦的培養(yǎng)基和血清都可以跟隨細胞一起購買。
定期仔細的觀察培養(yǎng)基中143B TK-細胞的形態(tài)和活性。肉眼觀察細胞培養(yǎng)基，檢查是否污染。這包括異常的pH變化(紅色變?yōu)辄S色或紫色)、渾濁度或有無顆粒。同時，仔細檢查是否有小真菌菌落，它們漂浮在液體和空氣交界面。特別是要檢查容器的邊緣，因為這些位置不易通過顯微鏡被檢查到。
143B TK-細胞,大多數(shù)原代細胞、有限傳代細胞系和連續(xù)傳代細胞系都是單層貼壁細胞。其他細胞，尤其是那些來自造血或某些腫瘤組織，是懸浮生長的。
143B TK-細胞,任何ATCC細胞系的生長和增殖的詳細信息，參見運輸包裝里提供的具體細胞系的產品說明書。簡短版本的說明書，也可以在ATCC網站上找到。
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