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C-33 A細胞人宮頸癌細胞 細胞培養(yǎng)
貨號:BY-0620
品牌:乾思細胞
規(guī)格:T25瓶
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C-33 A 細胞人宮頸癌細胞培養(yǎng)
C - 33 A 細胞源自人宮頸鱗狀細胞癌,是研究宮頸癌發(fā)**展機制、評估**藥物效果的重要細胞模型。由于其對培養(yǎng)條件較為敏感,規(guī)范的培養(yǎng)操作是維持細胞活性和生物學特性的關(guān)鍵。
C - 33 A 細胞呈貼壁生長,形態(tài)多為不規(guī)則多邊形,生長較為迅速,具有典型的癌細胞增殖特性。在培養(yǎng)時,優(yōu)選含 10% 胎牛血清(FBS)的 DMEM 培養(yǎng)基。胎牛血清中富含細胞生長所需的多種營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和激素,能夠支持細胞的代謝與增殖。同時,需向培養(yǎng)基中添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液,以預防細菌污染,保障細胞培養(yǎng)環(huán)境的無菌狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)環(huán)境要求嚴苛,需將 C - 33 A 細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中。37℃接近人體生理溫度,為細胞內(nèi)各種酶促反應提供適宜的溫度條件;5% 的二氧化碳濃度則用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,防止培養(yǎng)基過堿影響細胞生長。在細胞培養(yǎng)過程中,需定期觀察細胞狀態(tài),一般每 1 - 2 天在倒置顯微鏡下查看細胞生長密度與形態(tài)。當細胞融合度達到 80% - 90% 時,便需及時進行傳代。
傳代操作是 C - 33 A 細胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)。先用預熱的磷酸鹽緩沖液(PBS)輕柔沖洗細胞,去除殘留的培養(yǎng)基和代謝廢物;隨后加入適量 0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 溶液進行消化,將細胞從培養(yǎng)瓶壁分離下來。消化時需在顯微鏡下密切觀察,待細胞變圓、間隙增大,立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。通過輕柔吹打使細胞分散成單細胞懸液,按 1:3 - 1:5 的比例接種至新的培養(yǎng)瓶中,并補充新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。此外,為保證細胞質(zhì)量,需定期對 C - 33 A 細胞進行支原體檢測,避免支原體污染影響細胞特性;同時,及時凍存低代數(shù)細胞,防止細胞老化或發(fā)生性狀改變 。
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